Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
# Последовательность внесения стандартного и испытуемого образцов в цилиндры или лунки каждой чашки рекомендуется следующей: первыми вносятся растворы стандартного и испытуемого образца с малой концентрацией (S1, U1), затем со средней концентрацией (S2, U2), последними вносят растворы с большими концентрациями (S3, U3).
# Все растворы стандартного испытуемого образцов вносят в цилиндры или
лунки одной чашки Петри таким образом, чтобы растворы с большими
концентрациями не соприкасались между собой. Предлагаемый вариант
закапывания S1 U3 S2 U1 S3 U2.
Чашки инкубируют при подходящей температуре около 18 часов. Чашки могут выдерживаться до инкубации при комнатной температуре или, если необходимо, при
4 С0 в течение определенного промежутка времени, обычно от 1 до 4 часов для протекания диффузии, что уменьшает эффекты вариаций временных интервалов между нанесением растворов и улучшает качество кривой регрессии.
Измеряют диаметры (с точностью не ниже 0,1 мм) или площади кольцевых зон ингибирования (с соответствующей точностью) и вычисляют активность с использованием подходящих статистических методов.
В каждом определении используют достаточное для получения требуемой точности количество повторов. Может быть проведено несколько определений, результаты которых статистически обработаны для получения требуемой точности и для подтверждения того, что активность испытуемого антибиотика не ниже минимальных требований.
Таблица 2.7.2.-1.
Количественное определение методом диффузии.
Антибиотик Стандартный Растворитель, Буферный раствор Микрооргани Среда и Температур
образец используемый для (рН) зм конечное а
приготовления значение рН инкубации,
основного раствора (±0,1 ед. рН) 0С
#Азитромицин Азитромици- Буфер №6, Буфер №6, Bac.subtilis № 9 35-37,
на ФСО рН 6,0 рН 6,0 АТСС 6633, pH 7,8-8,0 30-37
Bac.subtilis,
var. Л2
1 мл этилового спирта Буфер № 4, Bac. cereus № 9 35-37
на 10 мг навески, pH 7,8-8,0 var. mYcoides pH 7,8-8,0
затем буфер № 4 до НВ
1000 ЕД/мл
#Ампициллин Ампициллина Буфер № 1, Буфер № 1, Staphylococcus № 11, 35-39
тригидрата pH 6,8-7,0 pH 6,8-7,0 aureus 209 P № 7+0,1%
ФСО глюкозы,
pH 6,8-7,0
#Амфотерицин Амфотери- Диметилсульфоксид Буфер № 1 рН 6,8-7,0 Candida utilis № 16+0,1% 29-31
В цина В ФСО (Срок годности р-ров ЛИА - 01 глюкозы,
при комнатной т-ре не pH 5,8-6,0
более 30 мин)
Бацитрацина Бацитраци 0,01 М 7,0 (0,05 М) Micrococcus A; 7.0 35-39
цинковая соль на цинковой хлористоводородная luteus
соли ФСО кислота NCTC 7743
CIP 53.160
ATCC 10240
#Бензилпеници Бензилпени- Буфер № 1, Буфер № 1, Staphylococcus № 11, 35-37
ллин циллина pH 6,8-7,0 pH 6,8-7,0 aureus 209 P № 7+0,1%
натриевой глюкозы,
соли ФСО pH 6,8-7,0
Блеомицина Блеомицина Дистиллированная 6,8 (0,1 М) Mycobacterium G; 7.0 35-37
сульфат сульфата вода smegmatis
ФСО ATCC 607
